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制备轴向取向的 Gr/PLLA 纤维基神经导管的方法

实验指南    2021-09-18 15:08

 

一、背景

     电纺制备的微-纳米级超细纤维可仿生天然细胞外基质的组成和结构,在组织工程与再生医学领域具有广阔的应用前景。但传统的电纺丝方法(Conventional electrospinning, CES)制备的取向纤维有序性差,影响细胞的取向生长和分化,不利于结构特异性组织工程支架(如神经导管)的构建。神经导管是用以桥接神经断端,为损伤神经提供一个良好再生微环境的管状支架,其导向作用与构筑导管的电纺纤维的取向度及生物活性有着重要依赖关系。

二、实验步骤

 

Gr/PLLA 复合纤维的电纺丝

1、首先将搅拌过夜并超声之后的纺丝液吸入 10  mL 的注射器中,再将该注射器与一 Teflon 细管相连接

2、将注射器安装到注射泵上,将纺丝针头固定到滚筒正上方,使二者之间的距离即接收距离为 19 cm,选择注射泵内置注射器规格参数与实际使用的注射器型号相匹配,调节注射器的注射速率为 1 mL/h,在针头形成半球形液滴时,打开高压电源并调节电压为 6-7  kV,实际情况以形成稳定射流为准,这时打开滚筒开关调节转数为 1000  rpm,环境参数为湿度:40~60%,温度:18~25  °C

3、半取向纤维采用同样的纺丝装置和条件,但由于 PEO 的分子量降低,纺丝液粘度降低,因此仅有很短的稳定射流段,在鞭甩区接收获得半取向纤维。将制备好的取向纤维置于真空干燥箱中至少 24 h,确保有机溶剂完全挥发,并在真空干燥箱中保存

 

神经导管的制备

1、首先将制备的纤维膜剪成所需的长条形,将其人工卷绕到直径为2 mm 的不锈钢圆棒上,卷绕过程中要保证纤维的方向与圆棒的长轴方向一致,并且纤维形貌不受破坏,尽量保证层与层之间的贴合,减小之间的缝隙。

2、将其放在温度为 55 °C 的恒温干燥箱内 15 min,即可得到轴向取向的神经导管,然后剪成长度为 5 mm 和 10 mm 的导管进行后续的研究。

一、背景

     电纺制备的微-纳米级超细纤维可仿生天然细胞外基质的组成和结构,在组织工程与再生医学领域具有广阔的应用前景。但传统的电纺丝方法(Conventional electrospinning, CES)制备的取向纤维有序性差,影响细胞的取向生长和分化,不利于结构特异性组织工程支架(如神经导管)的构建。神经导管是用以桥接神经断端,为损伤神经提供一个良好再生微环境的管状支架,其导向作用与构筑导管的电纺纤维的取向度及生物活性有着重要依赖关系。

二、实验步骤

 

Gr/PLLA 复合纤维的电纺丝

1、首先将搅拌过夜并超声之后的纺丝液吸入 10  mL 的注射器中,再将该注射器与一 Teflon 细管相连接

2、将注射器安装到注射泵上,将纺丝针头固定到滚筒正上方,使二者之间的距离即接收距离为 19 cm,选择注射泵内置注射器规格参数与实际使用的注射器型号相匹配,调节注射器的注射速率为 1 mL/h,在针头形成半球形液滴时,打开高压电源并调节电压为 6-7  kV,实际情况以形成稳定射流为准,这时打开滚筒开关调节转数为 1000  rpm,环境参数为湿度:40~60%,温度:18~25  °C

3、半取向纤维采用同样的纺丝装置和条件,但由于 PEO 的分子量降低,纺丝液粘度降低,因此仅有很短的稳定射流段,在鞭甩区接收获得半取向纤维。将制备好的取向纤维置于真空干燥箱中至少 24 h,确保有机溶剂完全挥发,并在真空干燥箱中保存

 

神经导管的制备

1、首先将制备的纤维膜剪成所需的长条形,将其人工卷绕到直径为2 mm 的不锈钢圆棒上,卷绕过程中要保证纤维的方向与圆棒的长轴方向一致,并且纤维形貌不受破坏,尽量保证层与层之间的贴合,减小之间的缝隙。

2、将其放在温度为 55 °C 的恒温干燥箱内 15 min,即可得到轴向取向的神经导管,然后剪成长度为 5 mm 和 10 mm 的导管进行后续的研究。