400-823-0080
info@biofabrication.cn     
当前位置: 主页 > 资料视频 > 实验指南 > 负载壳聚糖的三维纳米纤维支架的制备方法

负载壳聚糖的三维纳米纤维支架的制备方法

实验指南    2021-09-18 14:56

一、背景

      静电纺丝技术是一项操作简单、可以精确调控纤维直径和形貌的纳米技术。借助液体接收的三维静电纺丝法制备得到的纤维泡沫具有较大比表面积的、内部连通的、蓬松的三维网状结构。本论文通过调控参数,成功以此方法制备了聚丙烯睛三维纳米纤维网络,其特点在于,纳米纤维间距相较于其他静电纺丝法能达到15-20μm以上,形成均匀的、内部连通的孔隙结构。

二、实验步骤

1、制备蓬松的PAN三维电纺纳米纤维网络(FNFSs)

(1)配置聚丙烯睛( PAN )溶液:将工业PAN短纤维溶于N, N一二甲基甲酞胺( DMF)中,浓度为10% (w/v),  50℃下磁力搅拌过夜,溶解完全,得到静电纺丝的前驱溶液。

(2)调节电纺参数:PAN溶液装入注射器中,排除气泡。注射器针头为#23长针头(内径0.34 mm,长度10 cm ),注射泵带动注射器的推进速度为1.0 mlJh。接收装置是一个绝缘性很好的空心塑料半球,其中的液体为乙醇和水的混合溶液,体积比4:1,液面到注射器针头的距离为10 cm。塑料半球下方垫有铝箔,注射器针头和铝箔之间的电压为11 kV,由直流高压电源提供(接地)。注意维持环境湿度在40%}52%之间。由于PAN不溶于水,而溶剂DMF可以与水互溶,如果相对湿度一旦大于52%,喷嘴下方不远处·PAN将从溶剂中析出并迅速在空气中连成一条纱线:如果相对湿度小于40%,可以发现纤维在液体中的分散性显著降低,所得PAN网络的蓬松性也显著降低,持水性变差。

 

(3)制备蓬松PAN泡沫(Fluffy nanofiber sponges, FNFSs ):用玻璃棒将溶液中的电纺纤维收集于盛放有同浓度乙醇/水混合溶液的烧杯中,再用去离子水多次置换。之后,将适量电纺纤维分配于12孔板或48孔板中,轻微震荡,冷冻干燥过夜。

2、负载壳聚糖:将壳聚糖溶于1 % (v/v)的乙酸溶液中,配制浓度分别为0.050%0.075%0.100%0.125% (w/v, g/mL)。将制备好的FNFS浸入壳聚糖溶液中,轻微震荡,冷冻干燥过夜;

3、配制PBS缓冲液:NaCI 8.00 gKC10.20 gNa2HP04 1.44 g, KHZPOa0.24 g溶于800 mL去离子水中,再用HClNaOH调溶液pH7.4,最后用去离子水定容至1000 mL

4、戊二醛蒸气交联:将盛有25%戊二醛溶液的培养皿置于干燥器底部,培养皿上方的托架上放置第(2)步制得的纤维泡沫。盖上干燥器盖,减压,40 0C . 24h再将泡沫浸于甘氨酸溶液中( 0.1 M ),阻断未反应的醛基。PBS缓冲液多次洗涤,干燥后,制备得到CNSs。由0.050%, 0.075%, 0.100%0.125% (w/v)壳聚糖溶液制得的CNS,分别表示为CNS0.050CNS0.075CNS0.100, CNS0.125